وقع الحصار الكبير لمالطا (المالطية: L-Assedju l-Kbir) في عام 1565 عندما حاولت الإمبراطورية العثمانية احتلال جزيرة مالطا ، ثم احتلها فرسان الإسبتارية. استمر الحصار قرابة أربعة أشهر ، من 18 مايو إلى 11 سبتمبر 1565.

كان المقر الرئيسي لفرسان الإسبتارية في مالطا منذ عام 1530 ، بعد طردهم من رودس ، من قبل العثمانيين أيضًا ، في عام 1522 ، بعد حصار رودس. حاول العثمانيون أولاً الاستيلاء على مالطا عام 1551 لكنهم فشلوا. في عام 1565 ، قام السلطان العثماني سليمان القانوني بمحاولة ثانية للاستيلاء على مالطا. صمد الفرسان ، الذين بلغ عددهم حوالي 500 مع ما يقرب من 6000 جندي ، في الحصار وصدوا الغزاة. أصبح هذا الانتصار أحد أكثر الأحداث شهرة في أوروبا في القرن السادس عشر ، لدرجة أن فولتير قال: "لا شيء معروف أكثر من حصار مالطا". لقد ساهم بلا شك في تآكل التصور الأوروبي لمناعة العثمانيين ، على الرغم من استمرار التنازع على البحر الأبيض المتوسط ​​بين التحالفات المسيحية والأتراك المسلمين لسنوات عديدة ، وكان الحصار ذروة الصراع المتصاعد بين التحالفات المسيحية والعثمانية الإسلامية. إمبراطورية من أجل السيطرة على البحر الأبيض المتوسط ​​، وهي مسابقة تضمنت الهجوم التركي على مالطا عام 1551 ، وتدمير العثمانيين لأسطول مسيحي متحالف في معركة جربة عام 1560 ، والهزيمة العثمانية الحاسمة في معركة ليبانتو عام 1571.