El asentamiento de Jamestown en la Colonia de Virginia fue el primer asentamiento inglés permanente en las Américas. Estaba ubicado en la orilla noreste del río James (Powhatan) a unas 2,5 millas (4 km) al suroeste del centro de la moderna Williamsburg. Fue establecido por Virginia Company of London como "James Fort" el 4 de mayo de 1607 O.S. (14 de mayo de 1607 NS), y se consideró permanente después de un breve abandono en 1610. Siguió varios intentos fallidos, incluida la Colonia Perdida de Roanoke, establecida en 1585 en la isla de Roanoke, más tarde parte de Carolina del Norte. Jamestown fue la capital colonial desde 1616 hasta 1699.

A pesar del envío de más colonos y suministros, incluida la llegada en 1608 de ocho colonos polacos y alemanes y las dos primeras mujeres europeas, más del 80 por ciento de los colonos murieron en 1609-10, principalmente de hambre y enfermedades. A mediados de 1610, los sobrevivientes abandonaron Jamestown, aunque regresaron después de encontrarse con un convoy de reabastecimiento en el río James.

En agosto de 1619, los primeros esclavos registrados de África en la Norteamérica británica llegaron a lo que ahora es Old Point Comfort, cerca de la colonia de Jamestown, en un barco privado británico que enarbolaba bandera holandesa. Los aproximadamente 20 africanos de la actual Angola habían sido sacados por la tripulación británica del barco negrero portugués São João Bautista. Lo más probable es que trabajaran en los campos de tabaco como esclavos bajo un sistema de servidumbre basada en la raza. Uno de ellos incluía a Angela, que fue comprada por William Peirce. La concepción moderna de la esclavitud en los Estados Unidos coloniales se formalizó en 1640 (la audiencia de John Punch) y estaba completamente arraigada en Virginia en 1660. El segundo asentamiento de la Compañía de Londres en las Bermudas afirma ser el sitio de la ciudad más antigua del Nuevo Mundo inglés. , como St. George's, Bermuda, se estableció oficialmente en 1612 como New London, mientras que James Fort en Virginia no se convirtió en James Towne hasta 1619, y además no sobrevivió hasta el día de hoy. En 1676, Jamestown fue quemado deliberadamente durante la Guerra de Bacon. Rebelión, aunque se reconstruyó rápidamente. En 1699, la capital colonial se trasladó a lo que hoy es Williamsburg, Virginia; Jamestown dejó de existir como asentamiento y permanece hoy solo como un sitio arqueológico, el redescubrimiento de Jamestown.

Hoy en día, Jamestown es uno de los tres lugares que componen el Triángulo Histórico de Virginia Colonial, junto con Williamsburg y Yorktown, con dos sitios patrimoniales principales. Jamestowne histórico es el sitio arqueológico en la isla de Jamestown y es un esfuerzo cooperativo del Sitio histórico nacional de Jamestown (parte del Parque histórico nacional colonial) y Preservation Virginia. Jamestown Settlement, un sitio interpretativo de historia viva, es operado por la Fundación Jamestown Yorktown, una agencia estatal de la Mancomunidad de Virginia.