Le chemin de fer du canal de Panama (en espagnol : Ferrocarril de Panamá) est une ligne de chemin de fer reliant l'océan Atlantique à l'océan Pacifique en Amérique centrale. La route s'étend sur 76,6 km à travers l'isthme de Panama, de Colón (Atlantique) à Balboa (Pacifique, près de Panama City). En raison des conditions physiques difficiles de la route et de l'état de la technologie, la construction était reconnue comme une réalisation technique internationale, qui a coûté 8 millions de dollars américains et la vie d'environ 5 000 à 10 000 ouvriers. Ouvert en 1855, le chemin de fer a précédé le canal de Panama d'un demi-siècle ; le chemin de fer a joué un rôle essentiel dans la construction du canal au début des années 1900. Avec l'ouverture du canal, le tracé du chemin de fer a été modifié à la suite de la création du lac Gatun, qui a inondé une partie du tracé d'origine. Après la Seconde Guerre mondiale, l'importance du chemin de fer a diminué et une grande partie est tombée dans un état de négligence jusqu'en 1998, lorsqu'un projet de reconstruction du chemin de fer pour transporter le trafic intermodal a commencé; le nouveau chemin de fer a ouvert en 2001.

La ligne a été construite par les États-Unis et la principale incitation était la forte augmentation du trafic de passagers et de marchandises de l'est des États-Unis vers la Californie à la suite de la ruée vers l'or de 1849 en Californie. Le Congrès des États-Unis avait fourni des subventions aux entreprises pour exploiter des navires à vapeur de courrier et de passagers sur les côtes, et avait soutenu des fonds pour la construction du chemin de fer, qui a commencé en 1850; le premier train payant a parcouru toute la longueur le 28 janvier 1855. Appelé chemin de fer interocéanique lors de son ouverture, il a également été décrit plus tard par certains comme représentant un chemin de fer "transcontinental", bien qu'il ne traverse que l'isthme étroit reliant le Continents nord et sud-américains. Pendant un certain temps, le Panama Railroad possédait et exploitait également des navires de haute mer qui fournissaient des services de courrier et de passagers à quelques grandes villes de la côte est et de la côte ouest des États-Unis, respectivement.

Connue sous le nom de Panama Railroad Company lors de sa fondation au XIXe siècle, elle est aujourd'hui exploitée sous le nom de Panama Canal Railway Company (marque de rapport : PCRC). Depuis 1998, il appartient conjointement à Kansas City Southern et Mi-Jack Products et est loué au gouvernement du Panama. Le chemin de fer du canal de Panama est principalement dédié au transport de marchandises, mais il exploite également un service de passagers entre Panama City et Colón.