沃尔特·罗利爵士组织的探险队离开英格兰前往罗阿诺克岛（现位于北卡罗来纳州），以建立罗阿诺克殖民地。
罗阿诺克殖民地 (ROH--nohk) 的建立是沃尔特·罗利爵士在北美建立第一个永久性英国定居点的尝试。 1583 年，由汉弗莱·吉尔伯特爵士领导的英国人在伊丽莎白一世女王的皇家特权下声称纽芬兰的圣约翰是北美的第一个英国领土。第一个罗阿诺克殖民地由总督拉尔夫·莱恩于 1585 年在罗阿诺克建立位于现在美国北卡罗来纳州戴尔县的岛屿。(pp45,5459) 在 1585 年定居点失败后，由约翰·怀特率领的第二支探险队于 1587 年登陆同一个岛屿，并建立了另一个定居点，由于其人口随后不明原因的消失而被称为失落的殖民地。(ppxx,89,276) 莱恩的殖民地因缺乏供应和与当地美洲原住民的关系不佳而陷入困境。在等待理查德·格伦维尔爵士延迟补给任务期间，莱恩放弃了殖民地，并于 1586 年与弗朗西斯·德雷克爵士一起返回英格兰。格伦维尔两周后抵达并返回家园，留下一个小分队来保护罗利的主张。（pp7077）在1587 年，罗利派怀特前往切萨皮克湾建立“罗利之城”。在停下来检查格伦维尔的人时，旗舰飞行员西蒙·费尔南德斯强迫怀特的殖民者留在罗阿诺克。（pp8182,89）然而，怀特和费尔南德斯一起回到了英格兰，打算在 1588 年将更多的补给带回他的殖民地。（pp9394 ) 英西战争推迟了怀特回到罗阿诺克的时间，直到 1590 年，(pp94,97)，在他到达后，他发现该定居点得到了加固，但被废弃了。在栅栏上发现了一个神秘的词“CROATOAN”，怀特将其解释为殖民者已搬迁到克罗地亚岛。在他能够跟随这一领导之前，波涛汹涌的海面和失去的锚迫使救援任务返回英格兰。（pp10003）大约 112121 名殖民者的命运仍然未知。早在 1605 年的著作中就出现了他们与附近美洲原住民社区同化的猜测。（pp113114）詹姆斯敦殖民者的调查产生了罗阿诺克定居者被屠杀的报告，以及美洲原住民村庄具有欧洲特征的人的故事，但没有拿出确凿的证据。(pp116125) 直到 1834 年，乔治·班克罗夫特在《美国历史》中发表了他对这些事件的描述，人们对此事的兴趣开始下降。班克罗夫特对殖民者的描述，尤其是怀特的小孙女弗吉尼亚·戴尔，将他们塑造为美国文化的基础人物，并抓住了公众的想象力。（pp128130）尽管重新产生了兴趣，但现代研究未能找到考古证据来解释殖民者。（p270）
沃尔特·罗利爵士（；c. 1552 – 1618 年 10 月 29 日），也拼写为罗利，是英国政治家、士兵、作家、探险家，也是英国女王伊丽莎白一世最喜欢的客户。伊丽莎白时代最著名的人物之一，他在英国对北美的殖民统治中发挥了主导作用，镇压了爱尔兰的叛乱，在西班牙无敌舰队期间帮助保卫英格兰，并在伊丽莎白一世的领导下担任政治职务。
罗利出生于德文郡的一个新教家庭，是沃尔特·罗利和凯瑟琳·尚佩诺恩的儿子，也是理查德·格伦维尔爵士的堂兄和汉弗莱·吉尔伯特爵士同父异母的弟弟。人们对他的早年生活知之甚少，尽管在他十几岁的时候，他曾在法国度过了一段时间，参加了宗教内战。 20多岁时，他参与镇压爱尔兰殖民时期的叛乱；他还参加了对斯麦威克的围攻。后来，他成为了爱尔兰的财产地主和东明斯特Youghal的市长，他的房子仍然矗立在默特尔格罗夫。他在伊丽莎白一世女王的支持下迅速崛起，并于 1585 年被封为爵士。他获得了探索弗吉尼亚的皇家专利，为未来的英国定居铺平了道路。 1591年，他在未经女王许可的情况下秘密娶了女王的侍女伊丽莎白·斯罗克莫顿（Elizabeth Throckmorton），为此他和妻子被送往伦敦塔。在他获释后，他们退休到他在多塞特郡舍伯恩的庄园。
1594 年，罗利听说南美洲有一座“黄金之城”，便乘船前往寻找，并在一本促成“黄金国”传奇的书中夸大了他的经历。伊丽莎白女王于 1603 年去世后，罗利再次被囚禁在塔楼中，这一次是因为参与了反对詹姆斯一世国王的主要情节，后者对他不利。 1616 年，他获释带领第二次探险队寻找埃尔多拉多。在远征期间，由他的最高指挥官率领的人洗劫了一个西班牙前哨，违反了他的赦免条款和 1604 年与西班牙签订的和平条约。罗利回到英格兰，为了安抚西班牙人，他于 1618 年被捕并被处决。