巴尔的摩和俄亥俄铁路的皇家蓝从华盛顿特区开往纽约市的首次运行，这是美国第一辆使用电力机车的客运列车。
巴尔的摩和俄亥俄铁路（报告标记 B&O，BO）是美国第一条公共承运铁路，也是美国最古老的铁路，其第一段于 1830 年开通。巴尔的摩市的商人在一定程度上受益于在本世纪初修建国道，希望继续与跨阿巴拉契亚定居者竞争贸易与 1797 年建成的奥尔巴尼-斯克内克塔迪收费公路和 1825 年开通的新建伊利运河（两者都服务于纽约） City），宾夕法尼亚州提议的另一条运河（将连接费城和匹兹堡），切萨皮克和俄亥俄运河（C＆O，连接国家首都华盛顿特区，尽管它从未到达俄亥俄州）和詹姆斯河运河，它指挥了往里士满和诺福克，弗吉尼亚的交通。起初，B&O 完全位于马里兰州，其原始线路从巴尔的摩港向西延伸至桑迪胡克（1834 年开业）。在那里，它与穿过波托马克进入弗吉尼亚的哈珀渡口（乘船，然后通过瓦格桥）相连，并与可通航的雪兰多河相连。
由于与马里兰州西部煤田贸易的 C&O 运河竞争，铁路无法使用哈珀斯费里以西的 C&O 通行权。因此，为了继续向西穿过阿巴拉契亚山脉，B&O 选择在弗吉尼亚州哈珀斯费里（自 1863 年起，西弗吉尼亚州）建造 B&O 铁路波托马克河渡口（1837 年）。这条线继续穿过弗吉尼亚州，到达帕特森溪和北支波托马克河交汇处以西的一点，在那里它回到马里兰州，到达坎伯兰（1842 年），与向西的主要路线国道相连。它到达了弗吉尼亚州芒兹维尔的俄亥俄河（1852 年），惠灵（1853 年），在那里它建立了一个终点站，几年后（1857 年）还到达了弗吉尼亚州的帕克斯堡，在一年中的部分时间里，在急流下方使航行变得困难。事实证明，这对美国内战期间联盟的成功至关重要，尽管冲突也造成了相当大的破坏和维修费用。战争结束后，B&O 合并了弗吉尼亚州和西弗吉尼亚州的几条支线，并向西扩展到俄亥俄州（包括朴茨茅斯的一个枢纽）、印第安纳州和伊利诺伊州。 B&O 的广告后来带有这样的座右铭：“将 13 个伟大的国家与国家联系起来”。
经过几次合并，B&O 成为 CSX 运输 (CSX) 网络的一部分。 B&O 还包括 Leiper Railroad，这是美国第一条永久性马拉铁路。 1970 年底，B&O 运营了 5,552 英里的公路和 10,449 英里的轨道，不包括史泰登岛捷运 (SIRT) 或雷丁及其子公司。它包括美国最古老的运营铁路桥。
当 CSX 将 B&O 铁路博物馆作为独立于公司的实体建立时，它向博物馆捐赠了巴尔的摩的一些前 B&O 克莱尔山商店，包括 Mt. Clare 圆屋，同时出售了其余财产。位于巴尔的摩 Camden Yards 铁路枢纽的 B&O Warehouse 现在占据了巴尔的摩金莺队目前的家——Camden Yards 的金莺公园右侧外墙的视野。
B&O Railroad 的部分不朽之处在于它是原版棋盘游戏《大富翁》中的四个特色铁路之一；它是船上唯一一条不直接服务于新泽西州大西洋城的铁路，该城市的地名和名称都是以大富翁的原始版本命名的。